產(chǎn)品簡介

木瓜蛋白酶（Papain），一種半胱氨酸蛋白酶，具有廣泛且特異的切割活性。包含肽鏈內(nèi)切酶活性，可裂解堿性氨基酸、亮氨酸或甘氨酸肽鍵；還具有酰胺酶以及酯酶活性。該酶由單一肽鏈組成，包含3個二硫鍵和1個維持酶活性的巰基基團，其活性位點包含7個亞單位（S1-S4和S1’-S3’），其中每個亞單位可容納底物1個氨基酸殘基。其活性主要由S2亞單位控制，該單位為可容納底物分子P2側鏈的疏水區(qū)，Papain特異性主要決定于位于該疏水區(qū)的疏水氨基酸或芳香族氨基酸殘基。

木瓜乳液至少富含4種半胱氨酸內(nèi)肽酶，包括木瓜酶、木瓜凝乳蛋白酶、氨基乙?；逆渻?nèi)切酶和木瓜蛋白酶Ω等。存在于乳汁細胞中的內(nèi)肽酶處于非活化狀態(tài)，但是一旦從乳汁細胞中分泌出來則迅速轉化為活性狀態(tài)。木瓜蛋白酶在上述內(nèi)肽酶中含量很少，但是該酶易于分離純化，研究的也最多。在生化研究中具有多種應用：1）在某些組織的水解過程中，木瓜蛋白酶比其他蛋白酶作用效果更好，但破壞性更低，常用于原代或神經(jīng)元細胞解離，例如，木瓜蛋白酶可從產(chǎn)后小鼠中分離具有活力和完整細胞形態(tài)的皮質神經(jīng)元、平滑肌細胞等。其研究表明，該酶分離得到的平滑肌細胞對興奮刺激的敏感性不受影響；2）用于某些蛋白質或酶的結構研究；3）用于紅細胞血清學修飾紅細胞表面以增強或破壞一些紅細胞表面抗原的反應性；4）用于血小板血清學；5）用于氨基酸、多肽、其他分子的酶促合成；6）從IgG和IgM中制備抗體Fab 片段；7）完整膜蛋白酶的溶解；8）用于從純化的蛋白多糖內(nèi)生產(chǎn)糖蛋白。

本品為經(jīng)兩次結晶懸液制備得到的凍干粉末，來源于番木瓜乳液（Carica papaya latex），比活力≥15 units/mg protein。

產(chǎn)品性質

CAS NO：9001-73-4

同義名：Papainase, papaya peptidase I

分子式：C40H30N10O6Cl2

分子量：23.4 kDa

活性位點（Active Site Residues）：Cysteine (C158)；Histidine (H292)；Asparagine (N308)

等電點（Isoelectric point,pI）：8.88

單位定義（Unit definition）：One Unit hydrolyzes one micromole of   benzoyl-L-arginine ethyl ester per minute at 25℃, pH 6.2, after activation in   a solution containing 1.1 mM EDTA, 0.067 mM mercaptoethanol and 5.5 mM   cysteine-HCl for 30 minutes.

最佳pH：6.0-7.0

抑制劑（Inhibitors）：PMSF; TLCK, TPCK;   alph2-macroglobulin; AEBSF; Antipain; Hg2+ andother heavy   metals; cystatin; E-64; Leupeptin; Sulfhydryl binding agents; Carbonyl   reagents; Alkylating agents

激活劑（Activators）：Cysteine; Sulfide and sulfite;   N-bromosuccinimide; Heavy metal chelating agents like EDTA;

運輸和保存方法

冰袋運輸。4℃保存。有效期6個月。

注意事項

為保證得到完全活性的木瓜蛋白酶，該酶需在酶活化緩沖液（含1.1 mM EDTA，0.067 mM mercaptoethanol和5.5 mM cysteine-HCl）中孵育30 min。建議使用前用0.22 μm濾膜過濾。

制備好的木瓜蛋白酶懸液放到4℃保存，不可凍存。

含有NaCl的木瓜蛋白酶懸液4℃保存約可穩(wěn)定保存幾個月，沒有明顯的酶活力喪失。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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