測(cè)定意義：

S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。

測(cè)定原理：

S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算NAG活性。

試劑組成和配制：

試劑二：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入6ml蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。

測(cè)定步驟：

混勻， 37℃振蕩反應(yīng)1h后，立即90℃水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻10000g 25℃離心10min，取上清液。

充分混勻，室溫靜置2min后，400nm處蒸餾水調(diào)零，測(cè)定吸光值A，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

S-NAG活力計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.00645x -0.0054；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y為吸光值。

單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

S-NAG活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反總÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)

T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； V反總：反應(yīng)體系總體積：9.25×10^-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。