測定意義：

血鈣幾乎全部存在于血漿中，所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結(jié)合鈣兩種形式，其中只有離子鈣直接起生理作用，它與結(jié)合鈣處于動態(tài)平衡，并受血液pH的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關(guān)，過高或過低都會影響正常生理功能。本試劑盒用于檢測血液中游離鈣濃度。

測定原理：

在強(qiáng)堿溶液中游離鈣與GBHA反應(yīng)生成紅色鈣-GBHA復(fù)合物，在520 nm有吸收峰；通過測定520 nm吸光度，計(jì)算游離鈣濃度。

組成：

試劑三：液體×1瓶（空瓶，試劑自備）。取30 ml試劑瓶。依次加入27 ml無水甲醇和3 ml丙酮，蓋緊混勻即可。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，3μmol/ml，4℃保存。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。

血鈣濃度測定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到520 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管：取1ml玻璃比色皿，依次加入蒸餾水50μl，試劑一200 μl，混勻；再加入試劑二200μl，混勻；最后加入試劑三400μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度，記為A空白管。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取1ml玻璃比色皿，依次加入標(biāo)準(zhǔn)液50μl，試劑一200 μl，混勻；再加入試劑二200μl，混勻；最后加入試劑三400μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測定管：取1ml玻璃比色皿，依次加入血液樣品50μl，試劑一200 μl，混勻；再加入試劑二200μl，混勻；最后加入試劑三400μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

血鈣濃度計(jì)算公式：

血鈣含量(μmol /dL血液)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V樣總= 300×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)

C標(biāo)準(zhǔn)液：3μmol/ml； V樣總：樣品總體積，1 dL=100 ml。

注意事項(xiàng)：

1、宜早晨空腹采血，并且采血后應(yīng)該盡快完成測定。

2、靜置5分鐘后立即測定。

3、加試劑三后，應(yīng)該在30 min內(nèi)完成該管的測定。

4、最低檢出限為1mmol/L。