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一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量檢測試劑盒 (分光光度法50T/48S)

貨號(hào) SH0621 售價(jià)(元) 408
規(guī)格 50T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0621

一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量檢測試劑盒 (分光光度法50T/48S)

50T/48S

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

NONitric OxideNO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機(jī)體的生理、病理過程中起著重要的作用。

測定原理:

NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2,在酸性條件下,NO2與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計(jì)算NO含量。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0621-50T/48S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

15ml

4℃避光

試劑二:粉劑

15ml

4℃避光

說明書

一份

試劑二:液體15ml×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min

自備儀器和用品:

天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。

樣品處理:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液)進(jìn)行冰浴勻漿。10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。

3. 體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品:直接測定。

測定步驟和操作表:

 

空白管

測定管

樣品(μl

 

400

提取液(μl

400

 

試劑一(μl

250

250

試劑二(μl

250

250

混勻,室溫靜置15min1ml玻璃比色皿,測定A550,ΔA=A測定-A空白  

 

NO含量計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986 

1、組織樣品:

1)按樣本質(zhì)量計(jì)算

NO含量(μmol/g 鮮重)=ΔA +0.0103÷0.016×V反總÷V÷V樣總×W×10-3

                  = 0.14×ΔA +0.0103÷W

2)按樣本蛋白濃度計(jì)算

NO含量(μmol/mg prot=ΔA +0.0103÷0.016×V反總÷V×Cpr×10-3

                  = 0.14×ΔA +0.0103÷Cpr

2、細(xì)胞:

NO含量(μmol/104 cell=ΔA +0.0103÷0.016×V反總÷V÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)×10-3

= 0.14×ΔA +0.0103÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

3、其他樣品:

NO含量(μmol/L=ΔA +0.0103÷0.016×V反總÷V樣                   

= 140×ΔA +0.0103

V反總:反應(yīng)總體積,0.9mlV樣:反應(yīng)中樣品體積,0.4mlV樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/ml

 

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